1樓:落葉無聲和落葉
方法都差不多,關鍵自己實際操作還得摸索,費時費力,建議你直接買試劑盒,齊氏生物的試劑盒一般都會有詳細步棸,而且售後服務很周到。
2樓:匿名使用者
目前常用ficoll密度梯度離心法直接分離和純化外周血單個核細胞。
方法:1. 在短中管中加入適量淋巴細胞分離液。
2. 取肝素抗凝靜脈血與等量hank's液或rpmi1640充分混勻,用滴管沿管壁緩慢疊加於分層液麵上,注意保持清楚的介面。水平離心2000rpm×20分鐘。
3. 離心後管內分為三層,上層為血漿和hank's液,下層主要為紅細胞和粒細胞。中層為淋巴細胞分離液,在上、中層介面處有一以單個核細胞為主的白色雲霧層狹窄帶(如下圖),單個核細胞包括淋巴細胞和單核細胞。
此外,還含有血小板。
4. 用毛細血管插到雲霧層,吸取單個核細胞。置入另一短中管中,加入5倍以上體積的hank's液或rpmi1640,1500rpm×10分鐘,洗滌細胞兩次。
5. 末次離心後,棄上清,加入含有10%小牛血清的rpmi1640,重懸細胞。取一滴細胞懸液與一滴0.2%臺盼蘭染液混合,於血球計數板上,計數四個大方格內的細胞總數。
單個核細胞濃度(細胞數/1毫升細胞懸液)=
4個大方格內細胞總數
────────── × 104×2(稀釋倍數)
46. 細胞活力檢測:死的細胞可被染成蘭色,活細胞不著色。計數200個淋巴細胞。計算出活細胞百分率。
活細胞數
活細胞百分率=────── ×100%
總細胞數
用本法分離pbmc,純度在90%以上,收穫率可達80~90%,活細胞百分率在95%以上。
外周血中三群的淋巴細胞流式怎麼選
實在看不懂你的中文說什麼。是什麼是三群?只能猜你是在問外周血細胞fsc ssc散點圖上淋巴細胞的定位?下圖示出的紅色gate,就是淋巴細胞 很多人太久沒發給他阮經天法國人就讓他的 流式檢測外周血淋巴細胞亞群一定要設定陰性對照嗎 可以不固定的,直接測沒問題的,3個一起。fitc和pe補償可能會大點 固...
經外周血淋巴細胞培養G顯帶後,在400 500條帶階段核型分析,其核型為「46,XY,Y 18」
意思bai是y染色 體的大小和你 du的第18號染色zhi體接近。人有46條染色體,其中dao有兩條是性染專色體,決定性屬別。男性是44 x y,女性是44 x x,y染色體來自父親,x染色體來自母親。你的精子有兩種,染色體分別是22 x或者22 y.你的妻子的卵子都是22 x 假如是22 y的精子...
淋巴細胞絕對值偏高是怎麼回事,淋巴細胞絕對值偏高什麼意思
淋巴細胞百分比為血常規的檢查專案之一,屬於白細胞分類計數的一項指標,一般淋巴細胞百分比偏高多見於感染性疾病,主要為病毒 染。但偶爾一次淋巴細胞比例增加,並不能提示具體疾病,還需結合自身症狀綜合考慮。一般情況下如果淋巴細胞不是一直偏高的話是沒有問題的,這種情況都屬於正常,是不需要過於擔心的,建議你過段...