1樓:匿名使用者
沒問題,gst融合蛋白在畢赤酵母中表達是分子生物學常用的手段。也有人說在昆蟲細胞中也可以表達。
什麼是融合表達載體
2樓:匿名使用者
是指能與外源基因(目的基因)在體外重組,並能匯入在表達系統中進行高效表達的一類物質。
3樓:張建明哥
融合載體是指 動物或者是植物的細胞 經過某種培養 經過酶的作用 使其細胞相融合 構成的新細胞 這就是融合載體 其中涉及到植物細胞培養 或者是動物細胞培養技術
尋找帶標籤的真核表達載體! 15
4樓:匿名使用者
這個是要看你想用哪套系統了。
這個沒你想象的那麼簡單。現在常用的真核表達系統有三種:畢赤酵母表達系統、桿狀病毒-昆蟲細胞表達系統、腺病毒表達系統。
每一類真核表達系統又包含不同的轉染和表達方式。尤其最常用的昆蟲細胞表達系統,製作重組桿狀病毒就有baculogold系統、bac-to-bac系統等常用的方法。所用的最初的穿梭載體都不一樣。
先多瞭解一下這方面資訊,選一個合適的宿主和方便的方法再下手吧。
5樓:uv鏡
一般情況下用真核生物作為載體不是一次性完成的
先要把目的基因接到病毒的dna,再用病毒侵染真核生物,病毒將其dna整合到真核生物的染色體上
用western檢測真核表達的帶有flag標籤的融合蛋白時,能用目的蛋白本身的抗體進行檢測,但用flag抗體確無法
6樓:匿名使用者
看你的flag抗體是否有問題,我是做抗體生產的,原來開發flag抗體時就會對其進行c端、n端、m端的qc檢測,正常情況下三端都需要有識別,我擔心你的抗flag抗體有可能不識別n端,還有一種可能就是你的融合蛋白不含flag標籤。你可以從這兩個方面入手解決,至於你運用什麼實驗設計,我想你應該完全沒問題。預祝你能夠順利解決此疑問。
7樓:匿名使用者
你能確定你的flag標籤管用嗎?如果flag標籤失效了,什麼都白搭。
8樓:快樂
做western時候 導致失敗的因素太多了 樓主能再說的詳細些嗎?站內吧
融合蛋白表達載體如何構建
9樓:johnny王子
兩個蛋白的序列,你給放在一起,在第一個蛋白前加atg,然後在最後一專個蛋白最後加終止密屬碼子,然後跟據載體的需求,在atg前和終止子後加沒切位點,沒切連結到表達載體上,就ok了,還可以再詳細些,參見隨便個表達載體的manual吧
10樓:匿名使用者
兩個cds串在一起插到一個質粒裡唄。。。
11樓:匿名使用者
這位同學,你也是明天考的基因工程吧。。。
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