crisprcas9基因敲除敲入怎麼做原理

2021-03-28 03:00:55 字數 1065 閱讀 5021

1樓:泉州指南針生物

crispr/cas9可謂是目前基因編輯領域最熱門的明星工具,從2023年張鋒教授結合crispr技術和二代測序技術開發了對人類全基因組的crispr敲除文庫,並在腫瘤細胞繫上利用該文庫進行了抗藥基因的篩選。在獲得陽性基因的基礎上獲得了新的抗性基因,發表在了science雜誌上。到目前,中國在crispr領域的研究處於世界領先水平,國家基因的申報中頻發出現crispr/cas9技術的應用,含有這項技術的文章也更容易發表高分文章。

crispr/cas9基因敲除、敲入怎麼做,原理?

2樓:kekokele可樂

基因工程技術 用限制性核酸內切酶(限制酶)敲除 dna連線酶敲入

crispr/cas9的原理

3樓:

此係統的工作原理是 crrna( crispr-derived rna )通過鹼基配對與 tracrrna (trans-activating rna )結合形成 tracrrna/crrna 複合物,此版複合物引導核酸權酶 cas9 蛋白在與 crrna 配對的序列靶位點剪下雙鏈 dna。而通過人工設計這兩種 rna,可以改造形成具有引導作用的sgrna (singleguide rna ),足以引導 cas9 對 dna 的定點切割。

作為一種 rna 導向的 dsdna 結合蛋白,cas9 效應物核酸酶是已知的第一個統一因子(unifying factor),能夠共定位 rna、dna 和蛋白,從而擁有巨大的改造潛力。將蛋白與無核酸酶的 cas9( cas9 nuclease-null)融合,並表達適當的 sgrna ,可靶定任何 dsdna 序列,而 sgrna 的末端可連線到目標dna,不影響 cas9 的結合。因此,cas9 能在任何 dsdna 序列處帶來任何融合蛋白及 rna,這為生物體的研究和改造帶來巨大潛力。

4樓:花瓣八卦

不到2分鐘,讓你認識crispr-cas9基因編輯技術的原理,太先進了!

crispr/cas9 基因敲除動物模型怎麼做

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