1樓:匿名使用者
你的問題問的感覺沒有針對性?能否說詳細點。用一抗和二抗肯定是有原因的,就像elisa中的一步法和兩步法,一步法當然省時而且方便,但是兩步法的靈敏度更高。
elisa如何選一抗與二抗
2樓:匿名使用者
一抗是與底物相結合的,同時一抗必須有抗原識別位點,能被另一種抗體識別並結合。
二抗是能與一抗的抗原識別位點識別並結合,同時,二抗必須有可以觀測、計量的性質。
這些性質可以是:①二抗本身帶有顏色,可以通過分光度儀檢測到二抗的濃度;②二抗還可以作為一種酶,催化另一種底物,通過檢測底物或者生成物的濃度檢測出二抗的濃度;等等……有很多,就是說必須是可測量的。謝謝!
3樓:匿名使用者
簡單舉個例子說,比如抗原是bsa,可以選鼠抗bsa-igg或兔抗bsa-igg等做一抗,然後選一個抗鼠igg的酶標抗體或者抗兔igg的酶標抗體。
一抗,就是直接針對抗原的抗體,二抗就是針對一抗的抗體,elisa用的是用酶標記過的二抗。
elisa間接法中一抗二抗的稀釋用pbst或pb**(包被液)有沒有什麼差異?
4樓:百浩生物
一般直接抄用pbs或者pbst就可以了,pb**應該是封閉液吧,理論上也可以。但有沒有差別,不好說,只有自己試過才知道,因為牛奶成份複雜,一般的指標是沒有影響的,但不能保證所有指標都適用。
商品化的elisa抗體稀釋液應該還含有一些穩定劑。但如果不存放,現配現用,與pbs或者pbst應該是沒有差別的。
5樓:匿名使用者
這個其實要針對bai不同du
的蛋白而言的,是需要自zhi己去具體試過才知道dao的~如果回是現配現用的話,一抗二答抗的問題應該不是特別大,但是如果是配置了長期儲存的話,我覺得還是去買點商品化的抗體稀釋液,因為低濃度的抗體儲存方法很容易降低他的結合力。
不過,我一般一抗的稀釋液都採取的pbst+bsa,pb**我用的很少,因為做出來後的本底並不理想~
6樓:匿名使用者
現配先用一般問題復
不大,pbst中加了tween,可以降低非特製異性反應,稀釋液中可以使用一定濃度的tween,不過如果實驗要求不高的話pbs就可以了,你說的包被液pb**不知道是什麼,包被液一般主要是提供一個緩衝體系,使蛋白通過疏水結合到酶標板上,ph一般為弱鹼性。
elisa裡一抗和二抗的區別
elisa測激素中一抗和二抗那個是特異性的?
7樓:匿名使用者
抗體蛋白復分為v區和c區,制v區識別抗原,c區負責免疫功bai能發揮,c區是du很保守的,因此不zhi同種類dao的一抗的c區相似度非常高,這也是為什麼一種二抗可以和多種一抗結合的原因
利用特異的抗原免疫小鼠就能得到一抗,
二抗則是利用一抗的c區免疫其他動物如羊得到的。
因此並不能說一抗和二抗哪個特異性強或弱
8樓:匿名使用者
一抗標記目的蛋白 二抗標記一抗 不知道你的特異性是指啥
9樓:匿名使用者
一般來說一抗是特異性的針對您的激素的。二抗只是針對一抗而言的。
elisa中二抗進行酶標為什麼優於一抗?
10樓:大兵小白
使用二抗也只是能部分結合在一抗上面進行識別,而一炕上的標記物是隻要一抗結合上了,就一定會有標記物能將其識別出來,而且其訊號放大效果要比使用二抗方法好的多!
11樓:匿名使用者
酶標的意思是酶結合到抗體上,是化學結合,破壞了活性。elisa反應是抗原抗體反應,結合到一抗就破壞了量化抗原抗體反應,。。。。。
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