1樓：匿名使用者
用瓊脂或瓊脂糖作支援介質的一種電泳方法。對於分子量較大的樣品，如大分子核酸、病毒等，一般可採用孔徑較大的瓊脂糖凝膠進行電泳分離。瓊脂糖凝膠電泳常見為題都有哪些？
dna帶模糊
dna降解：瓊脂糖凝膠電泳試驗中要避免核酸酶汙染
電泳緩衝液陳舊：電泳緩衝液多系使用後，離子強度降解，ph值上升，緩衝能力減弱，從而影響電泳實驗，建議經常更換電泳緩衝液。
所用電泳條件不合適：電泳時電壓不應超過20v/cm，溫度<30℃；巨大dna鏈電泳，溫度應該<15℃；檢車所有電泳緩衝液是否有足夠的緩衝能力
dna上揚量過多：應減少凝膠中dna上樣量。
dna樣含鹽量過高：電泳前通過乙醇沉澱去除過多的鹽。
有蛋白汙染：電泳前酚抽提去除蛋白
不規則dna帶遷移
對於λ/hindⅲ片段cos位點復性：電泳前於65℃加熱dna5分鐘，然後在冰上冷卻5分鐘。
電泳條件不合適：電泳電壓不超過20v/cm；溫度<30℃；經常更換電泳緩衝液。
dna變性：以20mm naci buffer稀釋dna，電泳前勿加熱。
帶弱或無dna帶
dna的上樣量不夠：增加dna的上樣量；聚丙烯醯胺凝膠電泳比瓊脂糖凝膠電泳靈敏度稍高，上樣量可適當降低。
dna降解：避免dan的核酸酶汙染
dna走出凝膠：縮短電泳時間，降低電壓，增強凝膠濃度。
對於eb染色的dna，所用光源不合適：應用短波長（254mm）的紫外光源
dna帶缺失
小dna帶走出凝膠：縮短電泳時間，降低電壓，增強凝膠濃度。
分子大小相近的dna帶不易分辨：增加電泳時間，核准正確的凝膠濃度。
dna變性：電泳前請勿高溫加熱nda鏈，以20mm naci buffer稀釋dna
dna鏈巨大，常規凝膠電泳不合適：在脈衝凝膠電泳上分析。
綜上所訴，瓊脂糖凝膠電泳實驗需注意以下幾點：
1.體系配製時候最關鍵的幾個試劑一定要確定它們還有效、或者還沒被汙染：引物，酶，超純水。
這些東西最好自己收好，寫上個人的名字放好，冰盒上記得帶上橡皮筋，這樣就不會因為別人翻冰箱時候把你的冰盒碰散了，試劑都碰掉。否則，你的試劑被汙染了，到時候陰性對照狂出條帶，再去找汙染源很麻煩。而且配置體系時候要注意保持實驗區的乾淨，事先可用小噴壺進行酒精噴霧，固定空氣中的dna，而且全程要戴手套，避免汙染體系。
2.pcr體系要摸準，最好用人家都做得很多的老體系來上手。
3.要想得到漂亮的電泳圖，可以在pcr開始時候就把膠倒上（前提是你的pcr總時間在1.5小時左右，並且1.
5小時候之後你還在實驗室。），讓凝膠涼著，這樣凝膠的上樣孔會比較規則，膠體裡面的其本身的孔徑也會較規則。如果你要第二天再跑膠，千萬記得把pcr完畢的樣本放入4℃儲存。
第二天做時候建議把膠涼上25分鐘左右。
4.瓊脂糖凝膠電泳上樣時候建議使用排槍上樣，不僅快速而且樣本加到膠孔裡的速度一致。當然，排槍上樣最好選用進口槍頭，國產槍頭就不要想了。
5.不管電泳室使用的頻率高還是低，我都建議每次瓊脂糖凝膠電泳時候更換電泳液，避免出現「＾」形條帶。
總結比較醋酸纖維薄膜電泳,瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯醯胺凝膠電泳
dna電泳一般使用的都是瓊脂糖凝膠電泳,電泳的驅動力靠dna骨架本身的負電荷.蛋白質電泳 一般指sds page 一般使用的都是聚丙烯醯胺凝膠電泳,電泳的驅動力靠與蛋白質結合的sds上所攜帶的負電荷.所以相同點就是樣品都是帶負電荷的,從負極向正極移動,移動的距離都和樣品的分子量有關.而且這兩個電泳體...
瓊脂糖凝膠電泳的電壓設定成多少好？高了有什麼壞處嗎
首先要知道電壓高低對跑膠的影響，才能決定快慢嘛 電壓高低是相對的，膠才是本質，電壓過高會因為發熱導致膠融化，跑太長時間marker會跑出去，甚至汙染電解液 如果電壓相同，你配0.8 的膠肯定比配1.2 要跑的快嘛 還有就是用途了，是分離樣品還是就觀察條帶，後者就可以跑快點嘛，有沒有東西一看就知道了 ...
高中生物凝膠電泳和凝膠色譜用途上有什麼區別
區別 凝膠電泳以葡聚糖凝膠電泳為例，要鋪一塊凝膠板，然後在板一端點樣，通電，由於樣 品帶電子，向正極方向移動，分子量大的跑的慢，小的跑得快，然後可以染色觀察。它的作用一般是分離核酸。凝膠色譜一般是指色譜柱，從上段加樣之後大分子物質難以進入凝膠空隙，從邊上流，而小分子就容易進入凝膠空隙，因此大分子流出...