1樓:逐塵流水
經過同一種限制性內切酶切割後會產生相同的粘性末端,所以目的
基因可內與目的基因連線,載體可與載容體連線,也有目的基因和載體連線。
用限制性內切酶切了以後,讓片段自己連線,就會出現三種連線方式,然後我們選擇出來需要的重組片段
基因工程構建基因表達載體的問題
2樓:字元與標點
我估計這個構建是利用你提到的酶切位點在你所說的「特定啟動子」和「終止子」之間插入目的基因,這樣一來,如果構建成功,就會破壞了原來位於該「特定啟動子」和「終止子」之間的四環素抗性基因,即「目的基因-載體連線物」不具有四環素抗性。又因為青黴素抗性基因在該特定啟動子和終止子之外,無論構建是否成功,都不會影響青黴素的抗性。綜上,「目的基因-載體連線物」的受體細胞具有青黴素抗性但不具有四環素抗性。
因此,可以首先利用青黴素抗性篩選出全部連線產物(在青黴素抗性培養基上可以存活),然後再利用四環素抗性進行篩選剔除「載體-載體連線物」(這種連線沒有破壞原有的四環素抗性)。也就是說所有既抗青黴素又抗四環素的都丟掉,只留下只抗青黴素不抗四環素的克隆。不知道這樣說你明白了嗎?
3樓:匿名使用者
1.用青黴素培養基和四環素培養基培養得到質粒.
2.用該切酶切提取的質粒
3.走dna電泳膠, 如果是目的基因-載體連線物,可以看到目的基因被切得條帶.
為何基因工程中,載體和目的基因要用同一種限制酶切割。?既然這樣,那為什麼為了防止粘性末端亂連線,要
4樓:匿名使用者
什麼時候要用兩種限制酶切了?把目的基因與載體切好後,聚合,會有目的-目的、載體-載體、目的-載體的基因,要的是目的載體的那一部分,然後就需要標記基因了
5樓:獨上江樓
目的基因和載體要用同一種限制性核酸內切酶切割,不然就沒法連了。用不同的限制酶切兩端,防止載體自連或目的基因自連。
基因工程中切割載體和含目的基因的dn**段是需使用同種限制酶是為什麼?是怎麼切割怎麼連的,能不能簡述
6樓:
所用的同種限制酶是限制性內切酶,也叫做內切酶,至於具體用哪個內切酶,要根據你要切的序列進行分析,分析的軟體很多,比如omiga,mega,primer premier......
至於怎麼切割怎麼連,下面已經說的很清楚了,簡說,就是識別-切割-連線。
基因工程的主要步驟:
1.目的片段的分離與合成,獲得目的片段
2.目的片段與載體連線(載體有兩種,一種叫做克隆載體,為了大量獲得該片段,並對在片段在基因層面進行研究;另一種叫做表達載體,為了將目的片段翻譯成蛋白,對蛋白進行研究);
3.含有目的片段的載體匯入宿主細胞內
4.對宿主進行檢測和篩選,主要檢測是否匯入成功,和匯入的基因是否你所要的;
7樓:真實
是用同種限制酶,讓他們的末端相同,鹼基配對
8樓:zy晨曦
限制性內切酶識別特定的酶切位點,作用於dna分子鏈上磷酸二酯鍵,同種限制酶才能切割出相同的粘性末端。連線時,相同的粘性末端通過鹼基互補配對,在dna連線酶的作用下形成磷酸二酯鍵。
基因工程的主要步驟:1、目的基因的獲得;2、目的基因與表達載體的連線;3、表達載體向宿主的轉化。
9樓:匿名使用者
這個是分子克隆最基本的原理,建議還是認真讀書,會了解得更透徹些。
基因工程中載體需要具備哪些特點,11,基因工程中載體需要具備哪些特點?12,密碼子的基本性質
最好有標誌基因 而且能在宿主內穩定存在 討論基因工程常用的載體有那些?作為基因工程的載體,應具備什麼特點 1 具有一個或多個限制酶切點,以供外源基因插入其中 2 具有標記基因,以鑑定重組是否進入受體細胞 3 能自我複製,否則可能導致重組丟失 4 對受體細胞無害 5 大小應適合,以便提取和在體外進行操...
(2)中的「目的基因 目的基因載體 載體」是說它們自己和
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基因工程中,常用的載體是(),基因工程中,常用的載體是(3個)
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