1樓：匿名使用者
實驗二 氨基酸的分離鑑定――紙層析法
一、目的
通過氨基酸的分離，學習紙層析法的基本原理及操作方法。
二、原理
紙層析法是用濾紙作為惰性支援物的分配層析法。
層析溶劑由有機溶劑和水組成。
物質被分離後在紙層析圖譜上的位置是用rf值(比移)來表示的：
rf = 原點到層析中心的距離 / 原點到容劑前沿的距離
在一定的條件下某種物質的rf值是常數。rf值的大小與物質的結構、性質、溶劑系統、層析濾紙的質量和層析溫度等因素有關。本實驗利用紙層析法分離氨基酸。
三、器材
1、層析缸 2、毛細管 3、噴霧器 4、培養皿 5、層析濾紙(新華一號)
四、試劑
1、擴充套件劑 650ml
是4份水飽和的正丁醇和1份醋酸的混合物。將20 ml正丁醇和5 ml冰醋酸放人分液漏斗中，與15ml水混合，充分振盪，靜置後分層，放出下層水層。取漏斗內的擴充套件劑約5ml置於小燒杯中做平衡溶劑，其餘的倒人培養皿中備用。
2、氨基酸溶液 0．5％的賴氨酸、脯氨酸、纈氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸溶液及它們的混合液(各組份濃度均為0．5％)。各5ml
3、顯色劑 50～looml0．1％水合茚三酮正丁醇溶液。
五、操作
1、將盛有平衡溶劑的小燒杯置於密閉的層析缸中。
2、取層析濾紙(長22 cm、寬14 cm)一張。在紙的一端距邊緣2～3 cm處用鉛筆劃一條直線，在此直線上每間隔2cm作一記號。
3、點樣用毛細管將各氨基酸樣品分別點在這6個位置上，幹後再點一次。每點在紙上擴散的直徑，最大不超過3 mm。
4、擴充套件 用線將濾紙縫成筒狀，紙的兩邊不能接觸。將盛有約20 ml擴充套件劑的培養皿迅速置於密閉的層析缸中，並將濾紙直立於培養皿中(點樣的一端在下，擴充套件劑的液麵需低於點樣線1 cm)。待溶劑上升15―20 cm時即取出濾紙，鉛筆描出溶劑前沿界線，自然乾燥或用吹風機熱風吹乾。
5、顯色 用噴霧器均勻噴上0。1％茚三酮正丁醇溶液，然後置烘箱中烘烤5分鐘(100℃)或用熱風吹乾即可顯出各層析斑點。
6、計算各種氨基酸的rf值。
思 考 題
1、何謂紙層析法?
2、何謂及f值?影響只f值的主要因素是什麼?
3、怎樣製備擴充套件劑?
4、層析缸中平衡溶劑的作用是什麼?
2樓：天藍依然乘風
實驗就要自己設計啊,要別人幫你設計還有什麼意思?別人只是能給你提供下題材和方向.你說了你做過蛋白質含量的測定,蛋白質含量有很多測定方法,你是否都用過呢?
比如現在奶粉問題就因為先前他們用凱式定氮,所以查不出三聚氰胺,用雙縮尿和烤馬式亮藍等方法卻能清楚的檢測出,你可以比較他們的異同並指出起原因啊.
誰能幫我想出一個生化實驗課題
3樓：
先說說你的具體用途啊
寫文章還是具體去操作實驗啊，如果後者的話要聯絡實驗室的實際條件的
能不能幫我啟用手機，你們能不能幫我查詢一下我這部手機的啟用日期
你只要連結wifi網路，或者插入手機卡，自動檢測運營商網路，那麼就算啟用了 手機怎麼會不能啟用呢？看你要啟用什麼功能 1.首先給你的iphonex安裝nano sim卡,安裝後按下電源鍵開機,2.選擇國家與地區,這裡當然選 中國 之後進入鍵盤設定頁面,小編建議大家選擇預設即可,3.因為啟用過程中手機...
能不能幫我看看電腦配置能不能玩劍網三
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能不能幫我寫封情書
1 你不開心的時候，我陪你，你哭泣的時候，我陪你，你心情很不爽的時候，我陪你，你不想回家的時候，我陪你，無論怎樣，我都陪你，只因為你是我最愛的人，你就是我的 你給我帶來好聽的音符。你是我的全部，你給我生命帶來了色彩。我永遠愛你！可以跟我在一起嗎？2 當你開心的時候，我也會不知不覺笑出來 當你難過的時...