1樓：糟油酒丸
樓主說的是擴增bai子，即兩引物目du標位點之間的序zhi列長度。daopcr過程中，擴增專就跟修路一樣，越長越屬費工。在能夠保證特異性的情況下，當然是越短越有效率，100-200bp就是綜合兩方面的考慮而建議的最佳擴增子長度吧。
其實有的人會說50-250bp，這跟各人經驗和具體實驗條件有關。
2樓：匿名使用者
1、熒光pcr引物不是100-200bp，而是20-30bp之間，
2、引物長度大小主要是由tm值決定的。
熒光定量pcr引物設計 普通pcr引物設計和熒光定量pcr引物設計的區別
3樓：南京金益柏生物科技****
實時定量的引物設計要求比較高，可以按普通引物設計的方法來做，但是專設計時要注意擴增屬的片段不能太大，最好在250bp-100bp之間。同時要保證這對引物有絕對的特異性，因為要是產生非特異性擴增的話，就不能準確的計量模板量了，這樣就失去了實時定...
普通pcr引物設計和熒光定量pcr引物設計的區別
4樓：匿名使用者
一、方法不同
來1、普自通pcr引物設計：引物的優劣直接關係到pcr的特異性與成功與否。
2、熒光定量pcr引物設計：通過熒光染料或熒游標記的特異性探針，標記跟蹤pcr產物進行實時監測反應，利用與之相適應的軟體對產物進行分析，計算待測樣品模板的初始濃度
二、原理不同
1、普通pcr引物設計：為了找到一對合適的核苷酸片段，使其能有效地擴增模板dna序列。
2、熒光定量pcr引物設計：在pcr反應體系中加入熒光基團，通過熒光訊號不斷累積而實現實時監測pcr全程，然後通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。在實時熒光定量pcr中，對全程pcr擴增過程進行實時檢測，根據反應時間和熒光訊號的變化可以繪製成一條曲線。
三、注意事項不同
1、普通pcr引物設計：引物應用核酸系列保守區內設計並具有特異性。產物不能形成二級結構。引物長度在15~30鹼基之間。
2、熒光定量pcr引物設計：實時熒光定量 pcr 儀應安放在溼度較低、灰塵較少、遠離水池的平穩檯面上，不能有強光直射，室內應通風良好，無腐蝕性氣體
5樓：南京金益柏生物科技****
實時定量bai的引物設計du要求比較高，可
以按zhi普通引物設計的方法來做，dao但是回設計時要注意擴增的片段答不能太大，最好在250bp-100bp之間。同時要保證這對引物有絕對的特異性，因為要是產生非特異性擴增的話，就不能準確的計量模板量了，這樣就失去了實時定...
6樓：
實時定量的引物抄
設計要求比較高，可以按普通bai引物設計的方法來做，但du是設計時要注zhi意擴增的片段dao不能太大，最好在250bp-100bp之間。同時要保證這對引物有絕對的特異性，因為要是產生非特異性擴增的話，就不能準確的計量模板量了，這樣就失去了實時定...
7樓：
建議來你還是選擇cds區不一自樣的地方設計bai引物吧，這樣可以避免du交叉汙染引起zhi的非特異擴增，dao擴增的序列長度不一定要一樣，每個引物你最好設計兩三對，然後做一個相對定量看看不同引物的擴增效率，選擇比較好的兩對引物做後續試驗，內參基因的引物不需...
8樓：
nf-kbmrna不就是nf-kb的mrna麼 做定量pcr就是測它mrna的表達量啊 nf-kbp65是nf-kb3 nf-kbp52是nf-kb2 所以這兩個還是有區別的 如果你是要檢測65的話
定量PCR的擴增曲線的平臺期為什麼是鋸齒狀
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