1樓：匿名使用者
你直接拿沒有切的質粒去轉化塗板 看有沒有長 如果長了就是連線的問題 如果沒長就是感受態的問題
凍融法制備農桿菌感受態細胞，並且轉化質粒相關問題。
2樓：佰草集
實驗結果
不能肯定來的說明結果是成功源
的，做bai實驗的陰性對照也很du重要，陰性zhi對照必須做出陰性結果。如樓dao下的網友所說，可能是你的感受態菌被質粒汙染了。現在我回答一下你的 追問吧：
「未轉化質粒的感受態細胞在同樣的lb上塗板也長出單菌落」，那麼這個長出的單菌落你有沒有做菌落pcr的鑑定？如果你沒有做菌落pcr的鑑定，還有一種可能就是你的板子上的抗生素濃度不夠，導致長出了菌，這個菌到底含不含有你的目的質粒，要做pcr鑑定，不要光看菌落長出與否。建議你把板子的抗生素濃度提高，同時看看未轉化質粒的感受態細胞在同樣的lb上塗板也長出的單菌落的pcr鑑定結果，從而判斷是否僅僅是感受態被質粒汙染了
3樓：匿名使用者
感受態可能被其它帶有這種抗生素抗性的質粒汙染了，制感受態的時候注意挑取單菌落，建議你重製，不然下游反應或是測序可能受影響
4樓：匿名使用者
不一定 建議重新做一下
農桿菌感受態細胞製備失敗和質粒沒有轉進去的可能原因
5樓：匿名使用者
1.你到底是 感受態沒製備好呢？還是轉化了，但平板上沒克隆呢？
2.你轉一個有人轉成功過的試試，排除感受態和你自己操作是不是有問題？
3.你用的是 哪種菌啊？lba4404？gv3101? 3抗有沒有+錯啊？
4.你是電擊？熱擊？
感受態細菌轉化後在氨苄板上培養12個小時,板上長出菌了，挑菌後搖菌
6樓：愛小腿子
實驗結果不能肯定的說明結果是成功的，做實驗的陰性對照也很重要，陰性對照必須做出陰性結果。如樓下的網友所說，可能是你的感受態菌被質粒汙染了。現在我回答一下你的 追問吧：
「未轉化質粒的感受態細胞在同樣的lb上塗板也長出單菌落」，那麼這個長出的單菌落你有沒有做菌落pcr的鑑定？如果你沒有做菌落pcr的鑑定，還有一種可能就是你的板子上的抗生素濃度不夠，導致長出了菌，這個菌到底含不含有你的目的質粒，要做pcr鑑定，不要光看菌落長出與否。建議你把板子的抗生素濃度提高，同時看看未轉化質粒的感受態細胞在同樣的lb上塗板也長出的單菌落的pcr鑑定結果，從而判斷是否僅僅是感受態被質粒汙染了
質粒轉化感受態細胞的原理是什麼（原理，感
7樓：匿名使用者
不對,通過轉化到感受態細菌
中,不是細胞.感受態的大腸桿菌,可以自己製作也可以通過購買.之後將細菌凃到含有抗生素的板子上,長出克隆後挑取單克隆,將單克隆加入含有抗生素的細菌培養基中培養,之後提取質粒,提取質粒可以購買相應的試劑盒,按照試劑盒的說明書操作即可.
質粒是帶有抗性基因的,只有含有該質粒的細菌才能在含有對應抗生素的培養基中存活並增殖,這樣就能確保是你的表達載體質粒.當然為了防止雜菌的汙染,整個過程中最好是無菌操作.而表達載體質粒有可能出現突變等情況,所以可以在提出質粒之後,取少量質粒送測序,來確保序列的無誤.
農桿菌轉化後菌落pcr就是不出目的條帶，求助
8樓：匿名使用者
沒有轉化成功；
調整pcr條件；
提取質粒後再pcr。
農桿菌轉化法的步驟中T DNA是怎麼進入受體細胞的
人們將目的基因插入到經過改造的t dna區，藉助農桿菌的感染實現外源基因向植物細胞的轉移與整合，然後通過細胞和組織培養技術，再生出轉基因植株。根癌農桿菌和髮根農桿菌中細胞中分別含有ti質粒和ri質粒，其上有一段t dna，農桿菌通過侵染植物傷口進入細胞後，可將t dna插入到植物基因組中。因此，農桿...
農桿菌侵染法的詳盡原理是什麼啊基因是怎樣整合的
農桿菌的ti質粒上有一片段,表達後可以使該質粒被整合到植物的染色體上.然後藉助植物組織培養篩選被整合的細胞並培養為植株 農桿菌的侵染植物 根癌農桿菌侵染植物是一個非常複雜的過程。根癌農桿菌具有趨化性，即植物的受傷組織會產生一些糖類和酚類物質吸引根癌農桿菌向受傷組織集中。研究證明，主要酚類誘導物為乙醯...
在農桿菌轉化法中為什麼一定要把目的基因插入T DNA上
題主想問的是目的基因為什麼要插入染色體吧 t dna會在一個基因的產物 圖中左黑 作用下從質粒上轉移到染色體上，如果你想把基因匯入染色體，就一定要先把目的基因匯入質粒上的t dna部分 圖中紅色 t dna會帶著目的基因進入染色體的斷裂部分 插入是隨機的 至於細節，還在研究 至於質粒，它的確會複製，...