1樓：萬能的小屁
《土壤微生物研究原理與方法》 主編林先貴 高等教育出版社 2010
這本書應該是最新的了，我做實驗用的就是這本
2樓：匿名使用者
製備菌懸液，適當稀釋後鏡檢 採用血球計數板法可以得到微生物細胞的數量
土壤微生物數量的測定方法
3樓：匿名使用者
取一定重量的土bai壤，稱取1g，置於
du100ml無菌水中，充分振zhi
蕩，然後離dao心，取上專清液，就得到土壤浸出屬液（可以看做土壤中的微生物全部轉移至水中）。然後做梯度稀釋，取一定稀釋度的溶液，塗平板，培養後數菌落數，然後乘上稀釋倍數，就可得到1g土壤中該微生物的數量。
例如，你在稀釋10的7次方的平板上數出了15個菌落，則1g土壤中微生物數量為1.5×10的8次方個。
4樓：匿名使用者
稱取copy10g土壤2份，一份置於烘箱中烘至恆重，稱重。另一份置於裝有90ml無菌水和若干玻璃珠的250ml三角瓶中，充分振盪20分鐘，靜置1分鐘，無菌操作取1ml，做10倍梯度稀釋，取連續3個稀釋度的溶液，塗平板或傾注平板（計數放線菌和真菌要用選擇培養基），每個稀釋度2~3個重複，培養後數菌落數，然後乘上稀釋倍數，就可得到1g溼土壤中該微生物的數量，1g乾土壤中該微生物的數量再將前面結果除以乾土百分比。
土壤微生物量測定有沒有分子方法
5樓：匿名使用者
最準確的測定方法抄是用real-time qpcr。提取土壤中bai微生物的總dna，然後
du以16s rrna作為目標序列，設計引物zhi進行絕對dao定量。目的片段一般在200-300bp比較合適，所以引物可以採用v3或其它可變區的兩端。標準品就用已知濃度梯度的大腸桿菌就行，它的濃度可以用nano-drop測得。
6樓：匿名使用者
燻蒸法不能滿足你的要求？可以試試real-timepcr，實時定量pcr，或許可以。
1.測定微生物數量的方法有哪些？
7樓：麻煩不見了噶
細菌計數1.計數器測定法：
即用血細胞計數器進行計數。取一定體積的樣品細胞懸液置於血細胞計數器的計數室內，用顯微鏡觀察計數。由於計數室的容積是一定的(o.
1mm3)，因而根據計數器刻度內的細菌數，可計算樣品中的含菌數。本法簡便易行，可立即得出結果。
本法不僅適於細菌計數，也適用於酵母菌及黴菌孢子計數。
2、電子計數器計數法:
電子計數器的工作原理是測定小孔中液體的電阻變化，小孔僅能通過一個細胞，當一個細胞通過這個小孔時，電阻明顯增加，形成一個脈衝，自動記錄在電子記錄裝置上。
該法測定結果較準確，但它只識別顆粒大小，而不能區分是否為細菌。因此，要求菌懸液中不含任何碎片。
3、活細胞計數法
常用的有平板菌落計數法，是根據每個活的細菌能長出一個菌落的原理設計的。取一定容量的菌懸液，作一系列的倍比稀釋，然後將定量的稀釋液進行平板培養，根據培養出的菌落數，可算出培養物中的活菌數。此法靈敏度高，是一種檢測汙染活菌數的方法，也是目前國際上許多國家所採用的方法。
使用該法應注意：①一般選取菌落數在30～300之間的平板進行計數，過多或過少均不準確；②為了防止菌落蔓延，影響計數，可在培養基中加入o．001％2，3，5一氯化三苯基四氮唑(ttc)；③本法限用於形成菌落的微生物。
廣泛應用於水、牛奶、食物、藥品等各種材料的細菌檢驗，是最常用的活菌計數法。
4、比濁法
比濁法是根據菌懸液的透光量間接地測定細菌的數量。細菌懸浮液的濃度在一定範圍內與透光度成反比，與光密度成正比，所以，可用光電比色計測定菌液，用光密度(od值)表示樣品菌液濃度。
此法簡便快捷，但只能檢測含有大量細菌的懸浮液，得出相對的細菌數目，對顏色太深的樣品，不能用此法測定。
5、測定細胞重量法
此法分為溼重法和乾重法。溼重法系單位體積培養物經離心後將溼菌體進行稱重；乾重法系單位體積培養物經離心後，以清水洗淨放人乾燥器加熱烘乾，使之失去水分然後稱重。
此法適於菌體濃度較高的樣品，是測定絲狀真菌生長量的一種常用方法。
6、測定細胞總氮量或總碳量
氮、碳是細胞的主要成分，含量較穩定，測定氮、碳的含量可以推知細胞的質量。此法適於細胞濃度較高的樣品。
7、顏色改變單位法（colour change unit,簡稱ccu）
這種方法通常用於很小，用一般的比濁法無法計數的微生物，比如支原體等，因為支原體的液體培養物是完全透明的，呈現為清亮透明紅色，因此無法用比濁法來計數，由於支原體固體培養很困難，用cfu法也不容易計數，因此需要用特殊的計數方法，即ccu法。它是以微生物在培養基中的代謝活力為指標，來計數微生物的相對含量的，下面以解脲脲原體為例單介紹其操作：，簡
（1）取12只無菌試管，每一管裝1.8ml解脲脲原體培養基。
（2）在第一管加入0.2ml待測解脲脲原體菌液，充分混勻，從中吸取0.2ml加入第二管，依次類推，10倍梯度稀釋，一直到最末一管
（3）於37度培養，以培養基顏色改變的最末一管作為待測菌液的ccu，也就是支原體的最大代謝活力，比如第六管出現顏色改變，他的相對濃度就是10的6次方ccu/ml.
一般來說，比濁法和菌落計數法就可以滿足絕大多數細菌的計數，但是對支原體這樣比較特殊的微生物，用ccu法比較合適。
8樓：匿名使用者
1.顯微鏡直接觀察
2.平板計數
3.血球計數版計數
4.微生物特定成分分析
5.乾重法
6.比濁法
9樓：匿名使用者
活菌測量有血球計數板，此外還有細胞稱重法
微生物計數方法有哪些
10樓：匿名使用者
測定微生物計數的方法有很多,主要有以下幾種：
1.血細胞計數法
將稀釋的菌液樣品滴在血細胞計數板上,在顯微鏡下計算4~5箇中格的細菌數,並求出每個小格所含細菌的平均數,再以此為依據,估算總菌數.
①此法的缺點是不能區分死菌和活菌.
②對壓在小方格界線上的細菌,應當取平均值計數.
③此法可用於測定培養液中酵母菌種群數量的變化
2.稀釋塗布平板法
原理：每個活細菌在適宜的培養基和良好的生長條件下可以通過生長形成菌落.培養基表面生長的一個菌落,**於樣品稀釋液中的一個活菌.
①這一方法常用來統計樣品中活菌的數目
②統計的菌落數往往比活菌的實際數目低,原因是當兩個活多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落.因此統計結果一般用菌落數而不是用活菌數來表示.
③土壤、水、牛奶、食品和其他材料中所含細菌、酵母、芽孢與孢子等的數量均可用此法測定.但不適於測定樣品中絲狀體微生物,例如放線菌或絲狀真菌或絲狀藍細菌等的營養體等.
④此法若不培養成菌落,可通過將一定量的菌液均勻地塗布在玻片上的一定面積上,經固定染色後在顯微鏡下計數,這樣又稱塗片計數法.染色可用臺盼藍,臺盼藍能使死細胞染成藍色,可分別計數死細胞和活細胞.
3.濾膜法
濾膜法是當樣品中菌數很低時,可將一定體積的湖水、海水或飲用水燈樣品通過膜過濾器.然後將濾膜乾燥、染色,並經處理使膜透明,再在顯微鏡下計算膜上（或一定面積上）的細菌數.
此法也可以通過培養觀察形成的菌落數來推算樣品中的菌數.例如測定飲用水中大腸桿菌的數目：將已知體積的水過濾後,將濾膜放在伊紅美藍培養基上培養.
在該培養基上大腸桿菌的菌落呈現黑色,可根據培養基上黑色菌落的數目,計算出水樣中大腸桿菌的數目.
此法也是統計樣品中活菌的數目.
4.比濁法
原理是在一定範圍內,菌是懸液中細胞濃度與混濁度成正比,即與光密度成正比,菌越多,光密度越大.因此可藉助與分光光度計,在一定波長下,測定菌懸液的光密度,以光密度表示菌量.實驗測量時一定要控制在菌濃度與光密度成正比的線性範圍內,否則不準確.
5.顯微鏡直接計數法
在課本生物選修1生物技術實踐p22中「除了上述活菌計數法外,顯微鏡直接計數也是測定微生物數量的常用方法.」這裡說的顯微鏡直接計數,我認為應該是在稀釋塗布的基礎上不培養成菌落而通過染色的方法在顯微鏡下直接計數.再如濾膜法也一樣,可以有兩種情況.
另外,微生物計數法發展迅速,多種多樣的快速、簡易、自動化的儀器和裝置等方法可以用來統計微生物的數目.
11樓：
膜轉移法，在微生物計數的膜轉移法中，關鍵是將濾膜轉移到瓊脂培養基上，它可能是二次汙染的源頭，從而導致假陽性結果。可通過德國賽多利斯的microsart® @filter與microsart® @media實現一次性無菌過濾單元與免觸式膜轉移，即在蓋子中設有一個一體式膠圈，因此可以輕鬆地貼合濾膜並將其正確放置在瓊脂平板上。轉一圈，將其鎖定，準備培養。
土壤測定的氨氮包含微生物細胞中的嗎？ 20
土壤測定的氨氮包含微生物細胞中的嗎？這個當然一般包含在生物細胞中的。但是我們一般也是選擇要好好的測定之後才能測定。土壤測定的氨氮包含微生物細胞中的一部分的呀。在土壤測定的氨氮包含微生物細胞中的它是包含在之內的。這個確實是的，其實土壤的監測的話，裡面有很多說法，在裡面的氨氮之類的微生物細胞裡面，確實是...
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1 根據研究設計選擇具有代表性的土壤，確定取樣地。瞭解該地區的生物氣候等情況，確定取樣時間，避免雨季取樣。2 選擇未經人為擾動的區域取樣，耕地樣品要在施肥前採集。3 取樣時要對土壤 生物 氣候等環境因子進行調查記錄，如地形 植被 土壤剖面結構 土壤水熱狀況 酸鹼度 有機質含量等 4 取樣時所有工具 ...