1樓:t學海無涯
蛋白質中的肽鍵在鹼性溶液中可以和二價銅離子產生紫紅色反應。
雙縮脲試劑的反應原理
2樓:徐姑娘
答:雙縮脲試劑本是用來檢測雙縮脲,由於蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵,因此也能與銅離子在鹼性溶液中發生雙縮脲反應。
雙縮脲試劑是一個用於鑑定蛋白質的分析化學試劑。它是一個鹼性的含銅試液,呈藍色,由 氫氧化鈉或氫氧化鉀、0.
01g/ml硫酸銅和酒石酸鉀鈉配製。會遇到蛋白質顯紫色。
當底物中含有肽鍵時(多肽),試液中的銅與多肽配位,配合物呈紫色。可通過比色法分析濃度,在紫外可見光譜中的波長為540nm。鑑定反應的靈敏度為5-160mg/ml。
雙縮脲試劑中真正起作用的是 硫酸銅,而 氫氧化鉀僅僅是為了提供鹼性環境,因此它可被其他鹼,如氫氧化鈉所代替。向試劑中加入碘化鉀,會延長試劑的使用壽命。 酒石酸鉀鈉的作用是保護反應生成的絡離子不被析出變為沉澱,從而使試劑失效。
[1]需要注意的是,能與雙縮脲試劑發生紫色反應的化合物分子中至少含有兩個肽鍵。因此,二肽無法用它來檢驗。
一、優點:雙縮脲法測定蛋白質測定範圍能夠是1~10mg蛋白質,操作簡單、快捷。既適合手工操作,又適合自動化分析,重複性好、線性關係好, 雙縮脲試劑可以長期儲存( 若貯存瓶中有黑色沉澱出現,則需要重新配製)。
二、缺點:靈敏度差,測定範圍窄,樣品需要量大,不同的蛋白質產生顏色的深淺相近,因此它常用於需要快速,但並不需要十分精確的蛋白質測定。 干擾測定的物質包括有:
在性質上是氨基酸或肽的緩衝液,如tris緩衝液,因為它們產生陽性呈色反應,銅離子也容易被還原,有時出現紅色沉澱。
雙縮脲試劑鑑別蛋白質的原理?!
3樓:你的合夥人
蛋白質的肽鍵與雙縮尿類似,可與銅離子在鹼性環境下(雙縮尿試劑)生成紫色絡合物。稀氫氧化銅溶液(斐林試劑)有弱氧化性可與還原性糖中的醛基發生反應,生成磚紅色的氧化亞銅沉澱。
雙縮脲試劑是一種用於鑑定蛋白質的分析化學試劑。它是一種鹼性的含銅試液,呈藍色,由 g/ml氫氧化鈉或氫氧化鉀、 g/ml硫酸銅和酒石酸鉀鈉配製而成。
4樓:顓孫弘益鄲勇
具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產生紫色反應。蛋白質的肽鍵在鹼性溶液中能與cu2+絡合成紫紅色的化合物。
因此,看到顏色變化就能鑑別蛋白質。
5樓:吾乃高郵人炎黃子孫
肽鍵與雙縮脲試劑反應生成紫色絡合物。
6樓:田雞醬鳳爪
銅離子在鹼性條件下與兩個醯胺基或兩個直接連線的肽鍵,或能過一箇中間碳原子相連的肽鍵發生反應,生成紫色絡合物。蛋白質符合「通過一個碳原子相連的肽鍵」這一條。
7樓:網友
你好,雙縮脲是由兩分子尿素縮合而成的化合物,將尿素加熱到180度,則兩分子尿素縮合成一分子雙縮脲,並放出一分子氨。
雙縮脲在鹼性溶液中能與硫酸銅反應產生紅紫色絡合物,此反應稱為雙縮脲反應。
蛋白質分子中含有很多和雙縮脲結構相似的肽鍵,因此也能起雙縮脲反應,形成紅紫色絡合物。
8樓:匿名使用者
紫色絡合物分子結構式在鹼性溶液(naoh)中,雙縮脲(h2noc-nh-conh2)能與銅離子(cu2+)作用,形成紫色絡合物(該物質的分子結構式見圖),該反應即雙縮脲反應。
雙縮脲反應是肽和蛋白質所特有的,而為氨基酸所沒有的一種顏色反應。一般分子中含有兩個氨基甲酪基(即肽鍵:-co-nh-)的化合物與鹼性。
銅溶液作用,就會形成紫色或藍紫色絡合物。
注:除-co-nh-有此反應外,(-conh2-)、ch2-)、nh2-)、cs-cs-nh2)等基團亦有此反應。
雙縮脲試劑檢測蛋白質的原理
雙縮脲試劑鑑定蛋白質的原理
9樓:駱淑蘭戈子
鑑定生物組織中是否含有蛋白質時,常用雙縮脲法,使用的是雙縮脲試劑,發生的是雙縮脲反應。雙縮脲反應實質是在鹼性環境下的銅離子與雙縮脲試劑發生的紫色反應。而蛋白質分子中含有很多與雙縮脲(h2noc-nh-conh2)結構相似的肽鍵,所以蛋白質都能與雙縮脲試劑發生顏色反應,可以用雙縮脲試劑鑑定蛋白質的存在。
雙縮脲試劑的反應原理是什麼?
雙縮脲試劑和斐林試劑的作用原理分別是什麼?
為什麼要在雙縮脲試劑中加入酒石酸鉀鈉和碘化鉀
雙縮脲試劑用於鑑定蛋白質析化試劑鹼性含銅試液呈藍色由氫氧化鈉或氫氧化鉀 硫酸銅酒石酸鉀鈉配製。雙縮脲試劑真起作用硫酸銅氫氧化鉀僅僅提供鹼性環境其鹼氫氧化鈉所代替。快速加入防止蛋白質降解。斐林溶液ab要臨混合使用。1 試劑濃度配製同。斐林試劑 甲液 溶液 乙液 溶液。使用前臨配製,2ml甲液滴入4滴 ...
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