1樓：中國農業出版社
玻璃化法凍存程式抄
因材料的不同bai略有差異。據報道，薄du荷莖尖、梨zhi莖尖、三葉草頂端分生組織等需dao要預培養；康乃馨和甜薯等莖尖和分生組織不需要預培養。
有的材料不需要新增劑新增前過渡，如凍存康乃馨莖尖和馬鈴薯莖尖；有的材料保護劑則需逐級新增和分成分新增，如凍存薄荷莖尖和甜薯莖尖。
過渡處理能增加保護性成分向細胞滲入，減輕細胞在脫水時的損傷。保護劑的毒性及滲透損傷和程度與保護劑的濃度和保護劑處理時間和溫度有關。因此，玻璃化保護劑的處理時間和處理溫度是一個關鍵環節，不同材料差異較大。
化凍後洗滌既可除去高濃度的保護劑，又是一個過渡。洗滌液的濃度非常重要，洗滌液的滲透壓過高，細胞會因高滲而損傷，過低則會由於膨脹而損傷。常用的洗滌方法是：
1.2moll蔗糖濃度的培養基25攝氏度，洗滌10min。
植物的玻璃化法儲存有哪些特點？
2樓：中國農業出版社
玻璃化法儲存的原理和特點：包埋脫水法是指將包含有樣品的褐藻酸鈉專溶液滴向高鈣溶液，因
屬褐藻酸鈣的生成而固化成球狀顆粒，同時輔以高濃度蔗糖預處理樣品，使樣品獲得高的抗凍力和抗脫水力後，結合適當的脫水和降溫方式，液氮下儲存。包埋脫水法與玻璃化法有所不同，玻璃化法採用高濃度的複合玻璃化保護劑脫水樣品，減輕了兩步法儲存過程中的機械損傷和溶液效應，而包埋脫水法採用高濃度的蔗糖預處理樣品，避免二甲基亞碸和甘油的化學毒性，它對低溫保護劑敏感的植物樣品有著很大的應用潛力。
樣品在用褐藻酸鈉和氯化鈣包埋後，避免其裸露時可能受到的損傷，使樣品所處的環境更為恆定。
同時，包埋過程也是一個製作人工種子的過程。因此，包埋脫水法可以較大限度地使待保護材料的結構不致因實驗處理或操作中的溫度急劇變化而遭破壞；不需昂貴、複雜的降溫裝置，降溫過程不甚嚴格；樣品易於操作，被儲存樣品體積可以比較大；樣品可以獲得較高的抗凍力，提高儲存效果，使儲存後的樣品不經愈傷組織直接成苗，降低了遺傳變異的可能。油菜小孢子胚、咖啡的體胚、甘蔗莖尖和分生組織等經包埋脫水法儲存，其遺傳特性保持穩定。
植物的超低溫儲存玻璃化為哪幾個種類？
3樓：中國農業出版社
在人工超低溫儲存中，玻璃化分為部分玻璃化和完全玻璃化。部分玻璃化一內般是指細胞內玻璃化，容早期的快凍法和二步法等常規超低溫儲存都是屬於此種型別；完全玻璃化是指受高濃度保護劑作用後的細胞連同保護劑本身在快速降溫中都進入玻璃化。
目前的玻璃化法凍存就是指完全玻璃化法凍存。對單個細胞來說，常規超低溫儲存中的胞外冰晶幾乎是不具傷害性的，但對整個器官或組織而言，所謂的胞外冰晶仍然是在細胞的間隙中，它會造成組織機械性的損傷。然而，玻璃化法凍存採取完全玻璃化的形式，在器官和組織水平儲存，對保護細胞與細胞之間的聯絡方面有較好效果，在凍存大塊的組織和器官時，這個優點變得更加明顯。
植物的乾燥冷凍法儲存是怎樣做的？
4樓：中國農業出版社
乾燥冷凍法超低溫儲存：乾燥冷凍法也是快速冷凍法的儲存方法，一般是將植物材料經無菌、真空、矽膠或高濃度蔗糖等進行乾燥預處理，適度脫水，通過控制脫水速度和脫水程度以增強植物的抗凍性，然後液氮儲存。
最適脫水程度，因不同物種和不同組織可能有所不同，一般而論，乾燥冷凍法將植物材料的含水量由72%77%下降到27%40%後再浸入液氮中，這樣可使植物材料免遭凍死。
此法應用時也不需要昂貴的儀器裝置，操作簡便，是一種切實可行的超低溫儲存方法。
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