1樓:匿名使用者
實踐證明,「bai差生」做du不好計算型化學題的原因除了相zhi
關的知識點掌握的不
dao牢固內外,最致命的缺點是做題習慣不正確容,不知道怎樣把已知的條件進行轉化。如:以物質的質量為中心進行計算,把題目中的已知條件儘可能都轉化成物質的質量,然後再找和未知的聯絡,最後設未知數、列方程。
這些最基本的做題習慣,幾乎所有的「差生」都沒有掌握。
免疫熒光如何做定量分析
2樓:南京金益柏生物科技****
和免疫組抄化一樣,只能通過軟體分析得出一個「數值」,可以當一個「半定量」的指標,但我認為準確性差,如果是要分析蛋白的表達情況,建議用western比較好些。統計熒光強度的軟體沒有用過,以前只用過免疫組化的光密度分析軟體,影響結果的因素太多了。。。。。
人體組織切片三色免疫熒光怎麼做
3樓:南京金益柏生物科技****
抗體的**除了mouse和rb都是可以的
比如goat
只要不和之前用的一抗和二抗有重合都可以
顏色可以選擇cy5
tunel 和免疫熒光雙色可以在一起做
但是要把配色的方案設計好
通常免疫熒光的顏色多為紅、藍、綠、黃,也有些其他的顏色但不是很常用。我個人建議加藍色熒光。
你可以重新調整每個抗體的顯色顏色,根據你選擇的凋亡抗體決定了。
凋亡抗體可選豬抗、羊抗等都可以,就是種屬差異了,前提是有的賣啊,不行就調整其他抗體為羊抗。
總之,儘量滿足三色吧,如果買不到相應的抗體,就分開做了。
細胞生長密度多少適合做免疫熒光
4樓:南京金益柏生物科技****
我是做細胞的共培養,目的細胞種在transwell小室中,孔徑為1um,差不多就可以準備做嘮
請問石蠟組織切片的免疫熒光實驗步驟?
5樓:bie___汀
包埋好的標本用切片機切石蠟切片(5微米),並將蠟片貼附於多聚賴氨酸處理過的載玻片上。經60°C烘片2-8小時(都試過,沒啥差別,但非實質性器官應適當延長時間)。二甲苯i脫蠟30分鐘(若要保證脫蠟完全可將其加熱至40-60°C),二甲苯ii脫蠟10分鐘。
梯度酒精覆水:100%酒精3分鐘,100%酒精3分鐘,95%酒精3分鐘,85%酒精3分鐘,75%酒精3分鐘, 50%酒精3分鐘,蒸餾水3分鐘,蒸餾水3分鐘,pbs 5分鐘。進行抗原修復:
將切片置於0.1mol/l且ph=6.0的枸櫞酸液修復液中,用微波爐100火力三分鐘至微微沸騰,再用50火力維持7分鐘,停止加熱後自然冷卻20-30分鐘。
用pbs 3分鐘,用濾紙擦去標本外的pbs,滴加封閉血清(無色的5�s或免疫組化試劑盒北京中衫中的封閉液)在溼盒中37°C封閉30分鐘(室溫30分鐘也可)。用濾紙擦去封閉液,勿洗。滴加適宜濃度的一抗置溼盒中4°C孵育過夜(37°C1小時多也差不多),再用pbs 3分鐘×5次洗去一抗,用濾紙擦去標本外的pbs。
滴加熒光二抗室溫置溼盒中避光孵育1小時,用pbs 3分鐘×3次洗去二抗,用濾紙擦去標本外的pbs。滴加dapi 避光孵育2分鐘,可對標本進行顯核,藍色熒光,效果極佳。用pbs 1分鐘×3次洗去dapi,用濾紙擦去標本外的pbs。
最後用含甘油封片,並在熒光顯微鏡下立即觀察。
組織切片免疫熒光背景很深但目的沒有染上怎麼辦
6樓:
二者應該都具體要看自身實驗條件哪操作更便及抗體性質看實驗要求冰凍片要求較
高(低溫環境液氮冰凍切片機oct包埋劑等等)石蠟片製作比較簡單試劑較便宜另外看購買抗體適用於哪種片
免疫組化般都使用石蠟切片免疫熒光染色都冰凍切片比較容易操作需要修復;石蠟切片操作起步驟比較相說比較複雜點且需要抗原修復程再者購買抗體適合哪種切片應該說明書面寫清楚祝運
免疫熒光的圖是怎麼回事,免疫熒光圖片如何用photoshop進行merge
這個目的蛋白的抗體濃度是不是有點低了 或者抗原本身表達較低 感覺染色強度很弱 建議提高濃度試試 免疫熒光 如何用photoshop進行merge 免疫熒光 用photoshop進行merge 溶圖 的方法是 1 開啟熒光 版 2 開啟另 權外一張 把熒光 拖進來,ctrl t調整大小 位置 3 根據...
免疫熒光0 1 triton怎麼配
先配製的緩衝液。然後稱取溶液，加入 triton 100 這個要看它的濃度，此處是當成100 計算的 0.1 的triton怎麼配製 作免疫熒光時細胞固定後一定要加triton 100嗎 看你要染的目的蛋白位於細胞的位置了。如果位於細胞內。那麼加triton 100是必須的。因為triton 100...
免疫熒光中紅細胞的非特異染色，如何去除
樓上的回答簡直胡說八道 牛頭不搭馬嘴 紅細胞自身會有自發熒光，因此免疫熒光要避免的話組織塊最好要灌注乾淨，把血管內的紅細胞都灌注乾淨，就能很好地避免紅細胞的非特異染色 買廠家已經驗證過的特異性好的一抗 有圖有真相 這點最關鍵。如何減少免疫熒光檢測中細胞非特異性熒光染色 免疫組織化學又稱免疫細胞化學，...