1樓:facs印象
對,必須慢凍快融。
當細胞冷到零度以下時,細胞器會脫水,細胞中可溶性物質濃度升高,在細胞內形成冰晶。緩慢冷凍可使細胞逐步脫水,細胞內不致產生大的冰晶。相反,冰晶會很大,導致細胞膜、細胞器的損傷和破裂。
復甦快溶可防止小冰晶形成大冰晶(冰晶的重結晶)。
在冷凍細胞時,還應在凍存液中加入dmso等冷凍保護劑。dmso是一種滲透性性保護劑,可迅速透入細胞,降低細胞的冰點;可提高細胞膜對水的通透性,促進細胞內的水滲出細胞外,減少細胞內冰晶的形成;稀釋細胞內外未結冰溶液中的電解質,減少溶質損傷。
2樓:再續篇章
凍存的原則是:慢凍,主要是防止細胞在冷凍過程中形成冰晶,對細胞造成損害,加dmso也是這個原理。
復甦細胞的原則是:快融。主要是防止dmso在液體狀態下對細胞的毒害作用,快速使細胞進入復甦和生長狀態。
因此,細胞的凍存與復甦原則應該是慢凍快融。分別經過4度,-20度,-80度和液氮的依次過程進行凍存;經過37度水浴1分鐘之內解凍細胞凍存液進行復蘇。
3樓:糟油酒丸
一樓太可惡了。把錯誤答案拿出來,害人呀。
慢速冷凍是為了防止結成冰晶,冰晶會刺破細胞的膜等結構,造成細胞死亡。
快速復甦我就只是推測是為了快點讓細胞達到生理最適的溫度,恢復正常的生命活動。還有什麼其他道理就不清楚了。
4樓:匿名使用者
你說反了,應該是快速冷凍,慢速復甦,慢速冷凍細胞就會死亡。
細胞凍存與復甦的基本原則是快凍慢融,為什麼?
細胞凍存與復甦的基本原則是快凍慢融,為什麼?
5樓:匿名使用者
這是根據細胞的生理機能決定的。
細胞凍存復甦時,為什麼堅持 緩凍速融的原則
6樓:66的打醬油
速融是因為:快速復溫可以避免溶液從低溫向常溫過度時發生重結晶現象,從而減少結晶體對細胞的損害。
細胞復甦的步驟
7樓:花椒科普
真核細胞通常懸浮在帶有血清和冷凍劑的培養基內,儲存在-196°c 的液氮中。如果是雀團商業訂購的,通常儲存在用乾冰包裹的凍存管中。所以凍存後的細胞必須快速解凍後立即培養,以獲得最大的生存能力,為了除去凍存時的新增劑, 24 小時後敗數要更換培養基。
一、材料 培養基, 37』c 預熱。
培養瓶。裝有70 %乙醇的燒杯。
1ml 、10ml 的移液管頃枯橘、移液器及移液頭。
二、步驟 把凍存細胞的管子在37』c 的水浴融化,快速搖動, 1分鐘內使管內的細胞融化。
把融化的管子浸入裝有70 %乙醇的燒杯內,整個實驗在超淨臺內進行。
小心開啟凍存管,不要讓乙醇浸入管內。
將凍存管內的細胞轉移到培養瓶中,並立即加入預熱的培養基。
蓋好培養瓶的蓋子,培養24 小時。
用新培養基替換老培養基。
繼續培養2~3 天或按說明書上的建議進行操作。
1.融解的細胞必須馬上培養,如果來不及培養,就儲存在液氮中。
2.細胞通常凍存為1 ml 的體積,加入新的培養基至10ml 。
3.可以在融化了凍存細胞後,把細胞離心下來,並用新鮮的培養基重新懸浮細胞,這種做法只適用於那些對凍存劑敏感的細胞,或者笫二天因為有事不能更換新培養基的情況。
細胞凍存與復甦過程,應注意哪些細節,以提高細胞存活率
8樓:飛雨過江來
首先說一下細胞在凍存過程中的主要威脅:
胞外冰晶形成。
凍存過程中細胞外形成胞外冰晶的形成會對細胞膜造成機械性損傷脫水胞內冰晶形成。
因此在細胞凍存復甦過程中,要從以下幾個方面防止上述損傷形成:
總的原則:慢凍快融,即凍存過程要逐步降溫,能夠使用程式降溫儀當然最好了;復甦過程水溫要控制適當,一般選擇38℃,復甦過程要注意不斷搖晃以縮短時間;
選擇恰當的凍存保護劑,通常有dmso,人血白蛋白,甘油,羥乙基澱粉,海藻糖,丙二醇等等,這個最好能自己通過多次摸索,找出一個適合自己所培養型別的細胞的穩定最優的配比組合;
凍存保護劑要提前預冷,滴加過程要緩慢等;
文庫裡有一篇文章,你可以學習一下:
細胞的凍存與復甦要注意什麼 – 手機愛問
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