1樓：胡鬧鬧旅遊
pcr原理是生物學的聚合酶鏈反應。pcr技術的基本原理類似於dna的天然複製過程，其特異性依賴於與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。pcr是利用dna在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈，低溫（經常是60°c左右）時引物與單鏈按鹼基互補配對的原則結合，再調溫度至dna聚合酶最適反應溫度（72°c左右），dna聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈。
pcr反應特點：
1.特異性強。
引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循鹼基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及taqdna聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合（復性）可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。
2.靈敏度高。
pcr產物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克（pg=10-12）量級的起始待測模板擴增到微克（μg=-6）水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，pcr的靈敏度可達3個rfu(空斑形成單位）；在細菌學中最小檢出率為3個細菌。
3.簡便快速。
pcr反應用耐高溫的taq dna聚合酶，一次性地將反應液加好後，即在dna擴增液和水浴鍋上進行變性－退火－延伸反應，一般在2～4小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性汙染、易推廣。
4.純度要求低。
不需要分離病毒或細菌及培養細胞，dna粗製品及rna均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛髮、細胞、活組織等dna擴增檢測。
以上內容參考：百科-聚合酶鏈式反應。
2樓：斑馬斑馬
pcr的原理是利用dna在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈，低溫（經常是60°c左右）時引物與單鏈按鹼基互補配對的原則結合，再調溫度至dna聚合酶最適反應溫度（72°c左右），dna聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈。
pcr最有價值的應用領域就是對感染疾病的診斷。理論上，只要樣本有一個病原體存在，pcr就可以檢測到。
在實驗中發現，dna在高溫時也可以發生變性解鏈，當溫度降低後又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制dna的變性和復性，加入設計引物，dna聚合酶、dntp就可以完成特定基因的體外複製。
但是，dna聚合酶在高溫時會失活，因此，每次迴圈都得加入新的dna聚合酶，不僅操作煩瑣，而且**昂貴，制約了pcr技術的應用和發展。擴充套件資料。
標準的pcr過程分為三步：
1、dna變性：（90℃-96℃）：雙鏈dna模板在熱作用下，氫鍵斷裂，形成單鏈dna。
2、退火：（60℃-65℃）：系統溫度降低，引物與dna模板結合，形成區域性雙鏈。
3、延伸：（70℃-75℃）：在taq酶（在72℃左右，活性最佳）的作用下，以dntp為原料，從引物的3′端開始以從5′3′端的方向延伸，合成與模板互補的dna鏈。
每一迴圈經過變性、退火和延伸，dna含量即增加一倍。
有些pcr因為擴增區很短，即使taq酶活性不是最佳也能在很短的時間內複製完成，因此可以改為兩步法，即退火和延伸同時在60℃-65℃間進行，以減少一次升降溫過程，提高了反應速度。
熒光定量pcr的原理,熒光定量PCR的原理
pcr擴增時在加入一對引復物的同時制加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發射的熒光訊號被淬滅基團吸收 剛開始時,探針結合在dna任意一條單鏈上 pcr擴增時,tap酶的5 端 3 端外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團...
pcr擴增技術獲取目的基因的原理是
pcr技術的基本原理 類似於dna的天然複製過程，其特異性依賴於與靶序列兩端版互補的寡核苷酸引物。pcr由變性權 退火 延伸三個基本反應步驟構成 模板dna的變性 模板dna經加熱至93 左右一定時間後，使模板dna雙鏈或經pcr擴增形成的雙鏈dna解離，使之成為單鏈，以便它與引物結合，為下輪反應作...
什麼叫巢式PCR，巢式PCR是什麼意思？
就是多重pcr,第一次獲得產物濃度不夠,但迴圈數過多會造成產物質量不好,就會以第一次pcr產物為模板,設計內引物進行第二次擴增,獲得高質量產物 巢式pcr是一種變異的聚合酶鏈反應 pcr 使用兩對 而非一對 pcr引物擴增完整的片段。第一對pcr引物擴增片段和普通pcr相似。第二對引物稱為巢式引物 ...