1樓:匿名使用者
因為原核生物缺乏復翻譯後的制修飾,所以表達的真核蛋白和真核中表達有所差異,可能沒有生物學活性等,但是要是做免疫原應該沒問題;
基因需為cdna,不能含有內含子,原核細胞不能對mrna進行剪下;
要分析dna序列資訊,分析其密碼子,由於原核與真核生物的密碼子偏好性不同,所以有時可能會出現稀有密碼子而影響表達的情況;
要注意你要表達蛋白的大小問題,一般情況下大於70kd的蛋白在原核菌種不容易表達或表大量低;
原核表達出來的一般是包涵體,所以蛋白的復性很關鍵,否則表達出來了也不能用,沒有活性。
原核表達載體和真核表達載體的區別
2樓:威海博銳化機
一、表達載體不同:
原核表達載體構建重組表達載體:
1、載體酶切:將表達質粒用限制性內切酶(同引物的酶切位點)進行雙酶切,酶切產物行瓊脂糖電泳後,用膠**kit或凍融法**載體大片段。
2、pcr產物雙酶切後**,在t4dna連線酶作用下連線入載體。
真核細胞表達載體之一為pegfp-n1載體,具有對方面的優點。pegfp-n1載體上攜帶有egfp蛋白表達基因。
二、表達實現方式不同:
真核表達載體具有neo基因,可以採用g418來篩選已成功轉染了該載體的靶細胞。這些特殊的結構可以實現目的基因在靶細胞內的穩定表達。
三、獲得目的基因方式不同:
pegfp-n1載體從結構上看,質粒具有很強的複製能力,可以滿足隨宿主細胞**時跟隨胞質遺傳給新生的子細胞,這是真核細胞表達載體保證目的基因穩定表達的因素之一。
原核表達載體獲得目的基因:
1、通過pcr方法:以含目的基因的克隆質粒為模板,按基因序列設計一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點),pcr迴圈獲得所需基因片段。
2、通過rt-pcr方法:提取總rna,以mrna為模板,逆轉錄形成cdna第一鏈,以逆轉錄產物為模板進行pcr迴圈獲得產物。
3樓:匿名使用者
原核載體可以將真核基因表達,但是表達出來的蛋白是沒有活性的,因為缺少翻譯後修飾系統。。。真核的表達載體呢 由於比較大 不適合大量快速擴增,所以要在其載體上構建可以在原核生物 如大腸桿菌中複製的所需的複製原件 。。。。綜上 在應用的時候 要構建 穿梭質粒 可以穿梭於 原核和 真核 呵呵 還有就是 原核表達載體的基本元件和真核的有不同的地方 。。。。。
總覺得不夠正確答案 。。。。。有些人緣的蛋白在原核裡沒有蛋白翻譯後修飾,表達後沒有活性,這時候就得在真核裡表......
4樓:匿名使用者
主要是因為原核和真核表達系統所需的表達元件不同。
比如說啟動子,終止子在兩種表達系統中是不一樣的。
帶有真核表達元件的是真核載體,能在真核生物內表達;
帶有原核表達元件的是原核載體,能在原核生物內表達。
兩者都具有的為穿梭載體。
1)真核表達載體和原核表達載體就是能在真核生物或原核生物中表達的載體,它們一般都帶有能在真核生物或原核生物中表達的必需表達元件;
2)真核表達和原核表達的目的都是為了能夠大量獲得自己所需要的目的基因的表達產物,最好有生物活性,以便下一步的實驗需要.
3)原核表達載體一般只能在原核生物中表達外源基因,但有些穿梭載體可以分別在真核和原核生物中表達它們的表達元件.
原核生物的表達系統和真核的有什麼不同
真核生物和原核生物的細胞結構和遺傳資訊存在明顯差異,在基因組結構上,原核生物結構簡單,資訊量少 真核生物結構複雜,資訊量大,在基因表達調控上,雖然二者可以在複製 擴增 基因啟用 轉錄 轉錄後 翻譯和翻譯後等多級水平上進行,但轉錄水平調控是主要的,如何實施調控,真核基因表達調控的環節。轉錄翻譯在同一場...
簡述原核生物與真核生物mRNA結構特點及轉錄後加工特點是什麼
答 真核生物 基因組區別於原核生物基因組的特點有 1 非編碼dna含量大 回2 真核答生物基因組的序列型別 非重複序列含量較低,重複序列含量較高 3 有串聯基因 5 不連續基因 即有外顯子和內含子的區別 7 遺傳多型性 同一種類的不同染色體或不同個體之間的某一個染色體上的相同區域或基因座上含有兩個 ...
原核生物 真核生物的細胞中的RNA是什麼?是遺傳物質嗎
您好mrna的功能就是把dna上的遺傳資訊精確無誤地轉錄下來,然後再由mrna的鹼基順序決 內定蛋白質的氨基酸容順序,完成基因表達過程中的遺傳資訊傳遞過程。轉移rna transferrna,trna 把氨基酸搬運到核糖體上,trna能根據mrna的遺傳密碼依次準確地將它攜帶的氨基酸連結起來形成多肽...