1樓：匿名使用者
標準品一般情況下就是一直濃度的樣品，不管是dna也好，cdna也好。一般就專是整個實驗室在做熒光屬定量時候都會使用這個樣品。不過，要求不是很高，特別是在在相對定量的時候。
在絕對定量是資料分析也有不同，畢竟還有標準曲線可以利用。
2樓：匿名使用者
標準品指的是已知拷貝數的核酸，簡單點說就是已知量的dna。
獲取方法是通過一些儀器及方法測得dna含量，換算成拷貝數，再進行梯度稀釋，即可得到標準品
qpcr中的相對定量和絕對定量的區別
3樓：奔馬的香香豬
絕對定量是用已知濃度的標準品繪製標準曲線來推算未知樣品的量，絕對定量不同於相對定量，我們是驗室用biog kit做pcr實驗檢測目標rna，做下來ct值在28左右，s型曲線比較典型
4樓：匿名使用者
熒光絕對定來量中標準品：指
自用含有目的基因bai的質粒，知道質du粒的分子量和zhi濃度計算出拷貝數，然後dao倍比稀釋就作為絕對定量的標準品。
獲取：把目的基因p出來，然後接到質粒上，轉染搖菌擴增，然後再抽質粒，酶切純化。
最後把純化的目的基因做個鑑定。
實時熒光定量pcr中的絕對定量怎麼做
5樓：匿名使用者
用已知濃度的dna樣本（通常是質粒）梯度稀釋成一系列的樣本。做實驗的時候，這些標準品和待測樣本加在同樣一塊96孔盤的不同孔內。一起做pcr。
標準品的熒光強度和已知的濃度作圖，可以得到一條標準曲線。而待測樣本的熒光強度測出以後，就可以在標準曲線上算出樣本濃度了。
6樓：奔馬的香香豬
在pcr反應體系中加入熒光基團，利用熒光訊號積累實時監測整個pcr程序，最後通過標準曲線對未知模板進行定量分析。隨著pcr反應的進行，pcr反應產物不斷累計，熒光訊號強度也等比例增加。我們實驗室用biog-pcr技術測得的擴增曲線起跳值一般在30左右，每經過一個迴圈，收集一個熒光強度訊號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監測產物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
實時熒光絕對定量pcr實驗資料分析哪個指標啊？
7樓：孫清竹休壬
ct,是從基線到指數增長
的拐點所對應的迴圈次數，儀器中給出的ct就是你每個孔實際專的ct值ctmean,是你相
屬同樣品的幾個重複的ct值得平均值
如果是做的相對定量，用ctmean的結果就可以了，計算方法就是r＝2-δδct，現在很多儀器你只要設定的時候明確標出內參基因和目的基因，這個結果也是會有自帶軟體給計算出來的。
如果你是做絕對定量，那更方便，你只要在儀器設定的時候把你的標準品含量依次輸入，最後軟體會自動生成標準曲線什麼的，你最後只要分析og
sq的結果就可以了。
請問，熒光定量pcr中的標準品是每個樣本都需要有標準品做標準曲線，還是多個樣本有一個就行了？
8樓：匿名使用者
分幾次的話那就得每次都做標準曲線了！
只需要做一條就可以了 其實一般做都是半定量的 也就是測幾個之間的相對含量 根本不需要做標準曲線
9樓：匿名使用者
做一個就可以了 要克隆 純化 標準曲線要做的好
10樓：匿名使用者
絕對定量，原則上，只要做一次就可以了，但考慮到每次pcr之間有系統誤差，實際上每次都要做一個。
所以，你分開做的pcr，最好每次都做一個標曲，這樣比較準確。
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